在吸收光谱法测定中，浓度的相对误差最小的A值为（）。
A 、0.378
B 、0.5
C 、0.434
D 、1.00
参考答案
【正确答案：C】
测定时，控制适宜的吸光度（读数范围）最佳读数范围：用仪器测定时，应尽量使溶液吸光度A=0.80～0.20，溶液透光度值T=15％～65％。最佳值：相对误差最小时的透吸光度。
吸光度a与透光率t之间的关系如何?分光光度法测定时,a值取什么范围为宜?为什么
吸光度A与透光率T之间的关系：
分光光度法测定时，一般要求吸光度A在0.2-0.8之间，因为当吸光度在0.187-0.824之间时，浓度的相对误差在2%以内。
分光光度法：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定
性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的
实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射
到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
原理：
朗伯一比尔（Lambert - Beer）定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时，一部分被吸收，一部分透过，设入射光的强度为I0，透射光强度为I，则I/I0为透光度，用T表示。
1.当溶液的液层厚度不变时，溶液的浓度越大，对光的吸收程度越大，则透光度越小。
即：-lgT=a*c（式中a为吸光系数，c为浓度）
当溶液浓度不变时，溶液的液层厚度越大，对光的吸收程度越大，则透光度越小。
即：- lgT=a*b（b为液层厚度）
将以上两式合并可用下式表示：lgT=a*b*c
2.研究表明：溶液对光的吸收程度即吸光度（A）又称消光度（E）或光密度（OD）与透光度（T）呈负对数关系，即：A=-lgT
因此A=a*b*c，即朗伯一比尔定律，其意义为：当一束单色光通过一均匀溶液时，溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积呈正比。
分光光度计读数在何范围内误差较小
对于较先进的紫外-可见分光光度计，T测量的绝对误差△T主要受检测器的散粒效应的影响，光电检测器噪声近似比例于信号强度的平方根，即△T=KT1/2（K为比例常数）。 解得当T=0.135（A=0.86）时，测量的相对误差最小。由于先进仪器自身△T也较小，一般控制吸光度在0.1-2.0之间，就能保证测量精密度在0.5%之内。若读数超出上述范围，相对误差会迅速增大。
与传统的0.434比较
对普及型和中等性能的分光光度计，T测量的读数误差△T主要受热噪声或电子噪声影响，不随T本身而变化，是一个常数，约在0.002~0.01的范围。解得 T=0.368，因此，当T=0.368（A=0.434）时，测量的相对误差最小。
分光光度计，又称光谱仪(spectrometer)，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
原子吸收光谱法定量分析方法
转载：《分析测试百科网》
这是我写的“原子吸收光谱分析的定量分析方法”帖出来与大家共享，希望各位批评指正，在这先谢谢了~~
2.3 原子吸收光谱分析的定量方法
原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校正曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法，如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法，是其他定量方法的基础。
2.3.1 标准曲线法
标准曲线法(standard curve method)，又称校正曲线法(calibration curve method)，是用标准物质配制标准系列，在标准条件下，测定各种标准样品的吸光度值Ai(i=1，2，3，…)对被测元素的含量 ci(i=1，2，3，…)建立校正曲线A=f(c)，在同样条件下，测定样品的吸光度值Ax，根据被测元素的吸光度值Ax从校正曲线求得其含量cx。校正曲线如图2—4所示。
(对不起，图我现在都还没有画出来)图2—4 校正曲线及其置信范围(阴影部分表示置信范围)
校正曲线的质量对获得准确测定结果有着直接的影响，因此，我们在建立校正曲线过程中，应遵循以下的原则：
(1)选择精度好的分析方法在严格控制分析条件的情况下建立校正曲线
(2)在保证校正曲线为线性的条件下，应尽可能扩大被测组分含量的取值范围
(3)在实验工作量一定的情况下，适当增加实验点的数目、减少每一实验点的重复测定次数，比增加每一实验点的重复测定次数、减少实验点的数目能更有效地提高校正曲线的精度。但随着实验点数目的增加，校正曲线精度的提高速率越来越慢，实验点数目n大于6以后，精度提高速率很慢。从置信系数tα，f考虑，在 n<4时，tα，f较大，校正曲线的置信范围较宽，用校正由cx预测Ax的精度或Ax由反估cx的精度较差当n>6时，tα，f值减小的速率也很慢，校正曲线的置信范围变小的速率很慢，再靠进一步增加实验点数目提高标准曲线的精度是不合算的。因此，5～6个实验点建立校正曲线是合理的
(4)被测组分的含量应尽可能位于校正曲线的中央部分。位于校正曲线高、低含量(浓度)两端的实验点的测定精度较位于曲线中央部分的实验点的测定精度差，因此，对校正曲线两端的实验点的测定次数要多一些
(5)鉴于校正曲线低含量(浓度)区的测定精度较差，而空白溶液正位于这一测定精度差的区域，因此，以空白溶液校正仪器(即用空白溶液调零)是不合适的。合理的做法应是对空白溶液多进行几次测定，取其测定平均值，将它作为含量(浓度)为零的实验点参与校正曲线的拟合
(6)由于“空白值”的测定误差较大，且为随机变量，不同的取样会得到不同的空白值，因此，在扣除空白值时，直接扣除用空白溶液测定的空白值不是一个好方法。用校正曲线拟合得到的截距值作为实际空白值扣除会得到更好的结果。这是因为截距值是统计平均值，它比由空白溶液直接测定的值更稳定，精度更好
(7)测定未知样品时，重复测定可以提高估计值cx的精度，因此，在条件允许的情况下，多进行几次测定是有利的
(8)检验校正曲线是否发生变化，最好用不同浓度的标准溶液进行检验。比如建立校正曲线时用浓度为c1、c3、c5、c7、c9的五个实验点，检验校正曲线是否发生变化时，最好用浓度为c2、c4、c6、c8、c10的五个实验点。这是因为当两条标准曲线无显著性差异时，可以用一条共同的标准曲线来拟合这10个实验点，实验点数目增加能有效提高标准曲线的精度。若用相同浓度的标准溶液进行检验，当用一条共同的标准曲线来拟合这两组实验点时，实验点数目并没有增加，仍然是5个实验点，只是增加了每一个实验点的精度，这样并不能有效地提高校正曲线的精度。
如读者有兴趣想进一步详细了解校正曲线的建立、如何进行校正曲线的显著性(相关性)检验、线性范围的确定、精度与置信区间的确定和利用校正曲线进行预报和控制以及两条校正曲线如何进行比较等问题，可参阅邓勃编写的《分析测试数据的统计处理方法》，北京清华大学出版社1995年版第5章。
2.3.2 标准加入法
对标准曲线法的定义中，可以看出分析结果的准确性直接依赖于标准系列与被分析样品的组成的精确匹配。但在实际分析工作中，样品的基体、组成和浓度千变万化，要找到完全与样品组成相匹配的标准物质是很困难的。
标准加入法(standard addition method)是在若干份等量的被分析样品中，分别加入0、c1、c2、c3、c4、c5等不同量的被测定元素标准溶液，依次在标准条件下测定它们的吸光度Ai(i=1，2，3，4，5，…)，建立吸光度Ai对加入量ci的校正曲线(见图2—5)。因为基体组成是相同的，可以自动补偿样品基体的物理和化学干扰，提高测定的准确度。校正曲线不通过原点，其截距的大小相当于被分析试样中所含被测元素所产生的响应，因此，将校正曲线外延与横坐标相交，原点至交点的距离，即为试样中被测元素的含量cx。
标准加入法所依据的原理是吸光度的加和性。我们在应用标准加入法时应注意以下几点：
(1)标准加入法只能用于校正曲线线性范围内才能得到正确结果，对非线性校正曲线，吸光度会导致测定结果偏高。因此，所有的测量都应在线性范围内
(2)最低浓度的样品溶液最适宜的吸光度测量值在0.1～0.15范围内最适宜的待测元素加入量是使测量值增加约2，3和4倍，一般至少测定4个点(包括样品溶液点)，但各点必须仍在校正曲线的线性范围内
(3)当伴生物对测定影响不太严重时，标准加入法可以消除物理干扰和与浓度无关的轻微的化学干扰，但不能消除有浓度有关的干扰如电离化学干扰，同时也不能消除光谱干扰和背景吸收的干扰。应采用相应的消除和减小以上干扰的措施后，再用标准加入法
(4)应用标准加入法时扣除标准空白是必要的。空白和样品应该分别作标准加入法，然后作浓度扣除。因为两者基体不同、干扰不同，空白加标和样品加标的曲线的斜率是不同的，因此不能直接用扣除吸光度来计算。
2.3.3 浓度直读法
浓度直读法(concentration direct reading)的基础是标准曲线法。将标准曲线预先存于仪器内，只要测定了试样的吸光度，仪器自动根据内置的校正曲线算出试样中被测元素的浓度和含量，并显示杂仪器上。其测定的准确度直接依赖于：a、校正曲线的线性、稳定性b、测得的试样吸光度值必须落在校正曲线动态范围内。前面已经提到，吸光度测量是一种动态测量，实验条件的变化，不可避免地引起吸光度值的变化，条件a不能保证。根据最小二乘线性回归的原理，平均值所在的实验点( ， )一定落在校正曲线上。试样中被测元素含量偏离校正曲线线性范围的平均值 越远，测定结果的误差越大，而仪器通常没有明确浓度直读范围，不便控制。由此可见，浓度直读法定量的准确度要逊于标准曲线法和标准加入法。浓度直读法的优点是快速。
2.3.4 内标法
内标法(internal standard method)是相对强度法，是在标准试样和被分析试样中分别加入一定量的内标元素，在标准条件下测定分析元素和内标元素的吸光度比Ai/An，以Ai /An对ci(i=1，2，3，4，…)建立校正曲线，在同样条件下，测定试样中被测元素和内标元素的吸光度比Ax/An，根据所测得的吸光度比值从校正曲线求得试样中被测元素含量cx。内标法最大的优点是可以减少实验条件变动所引起的随机误差，提高了测定的精密度。
因为要同时测定被测元素与内标元素的吸光度，必须使用双通道原子吸收光谱仪器，而现在广泛使用的仪器是单通道原子吸收光谱仪器，因此，内标法在原子吸收光谱分析中很少应用。
内标元素与分析线对(被测元素的谱线为分析线，内标元素的谱线为内标线，两者组成分析线对)的选择：
(1)内标元素与被测元素在光源作用下应有相近的蒸发性质
(2)内标元素若是外加的，必须是试样中不含有或含量极少可以忽略的
(3)分析线对选择要匹配：或两条都是原子线，或两条都是离子线。尽量避免一条是原子线一条是离子线
(4)分析线对两条谱线的激发电位应有相近。若内标元素与被测元素的电离电位相近，分析线对激发电位也相近，这样的分析线对称为“均匀线对”
(5)分析线对波长应尽量接近。分析线对两条谱线应没有自吸或自吸很小，并不受其他谱对的干扰。
说明：文章内容引用了一些论坛中一些不知名的朋友的论述，在这里谢谢了啊~~~~
参考文献没有列出来：
邓勃主编。应用原子吸收与原子荧光光谱分析。北京：北京化工出版社，2003年
邓勃。原子吸收分光光度法。北京：清华大学出版社，1981年
邓勃。分析测试数据的统计处理方法。北京：清华大学出版社，1995年
邓勃，何华 。原子吸收光谱分析。：化学工业出版社，2004年
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