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结晶紫中性红胆盐琼脂的配制

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  • 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)培养基为选择性计数固体培养基,主要用于大肠菌群平板计数检验。该培养基的配制及使用方法为:称取本品 41.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,煮沸不要超过2 分钟。取适宜稀释度样品液 1ml,加入到无菌平皿中心,将冷至45℃ ± 0.5℃ 的 VRBA 10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后,再加3-4mlVRBA 覆盖平板表层 ,翻转平板,置于36 ± 1℃培养 18-24 小时。无需高压灭菌。临用时制备,不得超过3小时。

    VRBA的使用方法与其他培养基的不同之处在于:

    1、无需高压灭菌,煮沸不超过2分钟,必须现用现配。

    2、该培养基在倾注第一层凝固之后需要再用VRBA覆盖一层,然后再进行培养。

    为什么每个平板上均要倾倒两次结晶紫中性红胆盐培养基?主要是为了防止表面有迁徙性细菌生长,因为一旦有迁徙性菌落生长蔓延,那这块平板就很难能够清楚的计数了。再倒一次琼脂把可能存在的迁徙性菌落封在琼脂内,让其不能蔓延开来,这样就不会对结果观察造成影响了。所以再次倾倒可以防止菌落蔓延导致无法计数的现象发生。

    2023-10-23 23:51:42
  • 关于这个问题,配制方法:

    1. 在1000ml的蒸馏水中加入5g结晶紫和0.5g中性红,搅拌溶解。

    2. 将10g胆盐粉加入到溶解好的液体中,再加入10g琼脂粉,充分搅拌均匀。

    3. 将混合液加热至沸腾,继续搅拌5分钟。

    4. 关火,待液体温度降至50℃左右时,倒入培养皿中。

    5. 放置室温下凝固,即可使用。

    注意事项:

    1. 在制备过程中要注意卫生和消毒,避免细菌污染。

    2. 在加热过程中要不断搅拌,避免结块。

    3. 制好的琼脂要密封保存,避免污染和干燥。

    2023-10-23 23:51:42
  • 结晶紫中性红胆盐琼脂可以配制以下步骤:首先将20克琼脂加入1000毫升的蒸馏水中,加热搅拌至溶解,再加入0.5克的结晶紫和0.5克的中性红,搅拌均匀。接着加入10克胆盐,再次搅拌均匀。最后可以将混合溶液过滤灭菌,并烧杯或培养皿中凝固。这种琼脂常用于空气微生物计数和岛津氏抗菌试验等领域。

    2023-10-23 23:51:42
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