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全部3个回答 >细胞周期同步化的方法与原理
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方法：
1．DNA合成阻断法
DNA合成阻断法：这种方法是选用无毒或低毒的DNA合成抑制剂，特异和可逆地抑制DNA合成，而不影响处于其他时期细胞的运转，最终可将细胞群阻断在S期或G1/S交界处。
5-氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤以及高浓度AdR（脱氧核糖腺苷）、GdR（脱氧核糖鸟苷）和TdR（脱氧核糖胸苷）等均可以通过抑制DNA合成使细胞同步化。其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小，因此实验中常用TdR阻断法诱导细胞同步化。
2．分裂中期阻断法
某些药物，如秋水仙素、秋水酰胺和诺考达唑等，可以抑制微管聚合，因而能有效地抑制细胞纺锤体的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期[染色体着丝点是否着生纺锤丝是中期向后期发展的重要检验，而细胞的其他变化不受此影响，比如核膜核仁已完成解体消失，染色质已高度螺旋化成为染色体等等，这都是中期的重要特点]。处于间期的细胞，受药物的影响相对较弱，常可以继续运转到M期。将分裂中期细胞悬浮于新鲜培养液中继续培养，它们可以继续分裂并沿细胞周期同步运转，从而获得G1期不同阶段的细胞。
2023-10-23 14:39:24 -
人工选择同步化：有丝分裂选择法、密度梯度离心法
药物诱导法：DNA合成阻断法、分裂中期阻断法、条件依赖性突变株的应用
2023-10-23 14:39:24 -
细胞周期同步化的方法和原理:
1、自然同步化: 粘菌、有些动物卵细胞,它们是自然界存在的细胞周期同步过程。
2、人工选择同步化:M期。是指人为地将处于不同时期的细胞分离开来,从而获得不同时期的细胞群体。特点是细胞未受药物伤害,真实,同步化效率高;但获得的细胞数量少。
密度梯度离心法,是根据有些种类的细胞在不同时期的细胞在体积和重量上差别显著,可采用密度梯度离心方法分离出处于不同时相的细胞,适用于少数细胞。
3、人工诱导同步化:DNA合成阻断法,是一种采用无毒或低毒的DNA合成抑制剂(目前使用最多的是TdR和羟基脲)特异地抑制DNA的合成,而不影响处于其他时期的细胞进行细胞周期运转,从而将被抑制的细胞抑制在DNA合成期的实验方法。
同步化效率高,适于所有培养细胞;分裂中期阻断法,某些药物如秋水仙素、秋水仙胺、nocodazole等,可以抑制微管聚合,因而有效地抑制细胞分裂期的形成,将细胞阻断在细胞分裂中期。
它操作简便,效率 高。但药物毒性较大有时不能恢复周期正常运转。一般做法是将几种方法并用。
2023-10-23 14:39:24
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