二审并不一定可以申请笔迹鉴定，在民事诉讼中，根据《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》第二十五条规定，当事人申请鉴定，应当在举证期限内提出。如果在一审中没有申请笔迹鉴定的，二审法院按此规定应不予准许。
【法律依据】
《刑事诉讼法》第二百三十三条，第二审人民法院应当就第一审判决认定的事实和适用法律进行全面审查，不受上诉或者抗诉范围的限制。共同犯罪的案件只有部分被告人上诉的，应当对全案进行审查，一并处理。
二审并不一定可以申请笔迹鉴定，在民事诉讼中，根据《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》第二十五条规定，当事人申请鉴定，应当在举证期限内提出。如果在一审中没有申请笔迹鉴定的，二审法院按此规定应不予准许。
《刑事诉讼法》第二百三十三条，第二审人民法院应当就第一审判决认定的事实和适用法律进行全面审查，不受上诉或者抗诉范围的限制。共同犯罪的案件只有部分被告人上诉的，应当对全案进行审查，一并处理。
